Effects of Valproic Acid on Morphology, Proliferation, and Differentiation of Mesenchymal Stem Cells Derived From Human Gingival Tissue.

Purpose: Valproic acid (VPA), a histone deacetylase inhibitor, has been shown to affect cell growth and differentiation in various in vitro and in vivo models. The aim of this study is to evaluate the effects of VPA on viability and osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells derived from the human gingival tissue. Materials and Methods: Stem cells derived from the gingiva were grown in the presence of VPA at concentrations ranging from 0.125 to 8 mM. Cell morphology was assessed on days 3, 5, and 7, and cell proliferation was analyzed on the same days using a Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Alizarin Red-S staining was used to assess differentiation of the stem cells. Results: The control group showed a normal fibroblast morphology when cultured in growth media. The shape of cells in the 8 mM group was more flat than cells in other groups, and fewer cells were present. A statistically significant decrease in cell proliferation was seen in the 8 mM group. Results of Alizarin Red-S staining showed a significant decrease in mineralization in the 8 mM group. Conclusions: Taken together, this study demonstrated that VPA, at the tested concentrations, decreases the viability of stem cells derived from the human gingiva. The decreases in osteogenic differentiation were achieved via the decrease of Rux2 expression. The concentration and application time of VPA treatment should be meticulously controlled to minimize any detrimental effects. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Propósito: El ácido valproico (VPA por sus siglas en inglés), un inhibidor de la histona deacetilasa, ha demostrado afectar el crecimiento y diferenciación celular en varios modelos in vitro e in vivo. El objetivo de este estudio es evaluar los efectos del VPA en la viabilidad y diferenciación osteogénica de las células madres mesenquimales (MSC por sus siglas en inglés) derivadas del tejido gingival humano. Materiales y métodos: Se cultivaron células madres derivadas de la encía con la presencia del VPA en concentraciones que variaron desde 0,125 mM a 8 mM. Se evaluó la morfología de las células en los días 3, 5 y 7 y se analizó la proliferación de las células el mismo día usando un Juego de Cuenteo Celular-8 (CCK-8 por sus siglas en inglés). Se usó el manchado con Alizarina roja-S para evaluar la diferenciación de las células madre. Resultados: El grupo de control demostró una morfología normal de fibroblastos cuando se lo cultivó en el medio de crecimiento. La forma de las células en el grupo de 8 mM fue más plana que las células en los otros grupos y había menos células. Se observó una disminución estadísticamente significativa en la proliferación celular en el grupo de 8 mM. Los resultados del manchado con Alizarina roja-S mostró una reducción significativa en la mineralización en el grupo de 8 mM. Conclusiones: Tomados juntos, este estudio demostró que el ácido valproico, en las concentraciones probadas, reduce la viabilidad de las células madres derivadas de la encía humana. Las reducciones en la diferenciación osteogénica se lograron a través de una reducción de la expresión Rux2. La concentración y el tiempo de aplicación del tratamiento con ácido valproico debe ser meticulosamente controlada para minimizar cualquier efecto negativo. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

目的:ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬、バルプロ酸(VPA)はさまざまな生体外および生体内実験モデルにおいて細胞増 殖と分化に影響をおよぼす事がこれまでに明らかになっている。本研究目的はヒト歯肉組織由来間葉系幹細胞（MSC)の 成長能力と骨分化に作用するVPAの効果を評価することである。. 素材と方法:歯肉組織由来幹細胞をVPA存在下で0.125 mMから8 mMまでの濃度で培養した。3曰目と5日目に続き7日 目の時点で細胞形態を評価し、同時点でセルカウンティングキット-8 (CCK-8)を用いて細胞増殖を評価した。その後アリ ザリンレッドーS染料で幹細胞分化を評価した。. 結果:コントロールグループは増殖培地で培養した場合、正常な繊維芽細胞形態を示した。8 mMグループの細胞形態は他 のグループと比較するとフラットで、存在する細胞数も相対的に少数であった。8 mMグル一プでは細胞増殖においても統 計上有意な減少が見られ、アリザリンレッドーS染料検査結果に関しては8 mMグループは無機化におレ、て著しレ、減少が確 鼓、。れ/し。. 結論:総合すると本研究はバルプロ酸が実験に適用した濃度において、ヒト歯肉由来幹細胞の細胞増殖を低下することを 実証した。骨分化はRux2発現低下を介して低減した。このためバルプロ酸治療は濃度と適用時間を厳密に管理し、有害 作用を最小限に差し止めることが必要である。. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Objetivo: Foi demonstrado que o ácido valpróico (VPA), um inibidor da histona deacetilase, afeta o crescimento e diferenciação das células em diversos modelos in vitro e in vivo. O objetivo deste estudo é avaliar os efeitos do VPA sobre a viabilidade e diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais (MSCs) derivadas do tecido gengival humano. Materiais e Métodos: Células-tronco derivadas da gengiva foram cultivadas na presença do VPA em concentrações variando de 0,125 mM a 8 mM. A morfologia das células foi avaliada nos dias 3, 5 e 7, e a proliferação das células foi analisada nos mesmos dias usando-se um Kit-8 de Contagem de Células (CCK-8). Foi usado coloração com Vermelho-S de Alizarina para avaliar a diferenciação das células-tronco. Resultados: O grupo de controle demonstrou uma morfologia normal do fibroblasto quando cultivado em meios de crescimento. A forma das células no grupo 8 mM era mais chata do que as células em outros grupos, e menos células estavam presentes. A diminuição estatisticamente significativa na proliferação de células foi vista no grupo 8 mM. Resultados da coloração com Vermelho-S de Alizarina demonstraram diminuição significativa na mineralização no grupo 8 mM. Conclusões: Tomado conjuntamente, este estudo demonstrou que o ácido valpróico, nas concentrações testadas, diminui a viabilidade das células-tronco derivadas da gengiva humana. As diminuições na diferenciação osteogênica foram alcançadas via diminuição da expressão Rux2. A concentração e tempo de aplicação do tratamento com ácido valpróico deveriam ser meticulosamente controladas para minimizar quaisquer efeitos prejudiciais. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Amaç: Bir histon deasetilaz inhibitörü olan valproik asidin (VPA) çeşitli in vitro ve in vivo modellerde hücre büyümesini ve farklılaşmasını etkilediği bildirilmiştir. Bu çalışmanın amacı, VPA'nın insan gingival dokusundan elde edilen mezenkimal kök hücrelerin (MSCler) osteojenik farklılaşması ve canlılığı üzerindeki etkilerini araştırmaktır. Gereçler ve Yöntemler: Gingivadan elde edilen kök hücreler 0,125 mM ile 8 mM arasında değişen konsantrasyonlara sahip VPA varlığında büyütülmüştür. Üçüncü, beşinci ve yedinci günlerde hücre morfolojisi incelenmiş ve bir Hücre Sayım Kiti-8 (CCK-8) kullanılarak hücre proliferasyonu analiz edilmiştir. Kök hücrelerin farklılaşmasını değerlendirmek için Alizarin Kırmızı-S boyaması kullanılmıştır. Bulgular: Büyüme ortamında kültüre edildiğinde kontrol grubu normal bir fibroblast morfolojisi göstermiştir. 8 mM grubunda daha az hiicre mevcuttur ve bu hücrelerin şekli diğer gruplara kıyasla daha düzdür. 8 mM grubunda hücre proliferasyonu açısından istatiksel olarak anlamlı bir düşüş izlenmiştir. Alizarin Kırmısı-S boyama bulguları 8 mM grubunda mineralizasyonun anlamlı şekilde azaldığını göstermiştir. Sonuçlar: Tüm bulgular göz önüne alındığında bu çalışma, test edilen konsantrasyonlardaki valproik asidin, gingivadan elde edilen kök hücrelerin canlılığını azalttığını göstermiştir. Osteojenik farklılaşmadaki azalmalar Rux2 ekspresyonun azalması ile ortaya çıkmıştır. Herhangi bir olumsuz etkiyi en aza indirmek için valproik asit tedavisinin konsantrasyonu ve uygulanma zamanı oldukça dikkatli bir şekilde kontrol edilmelidir. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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