Detection and quantification of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli using real-time multiplex PCR.

Toplak, N ; Kovač, M ; et al.

In: Journal of applied microbiology, Jg. 112 (2012-04-01), Heft 4, S. 752-64

academicJournal

Aims: We describe a real-time quantitative multiplex polymerase chain reaction (qmPCR) assay to identify and discriminate between isolates of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli.

Methods and Results: Two novel sets of primers and hydrolysis probes were designed to amplify the unique DNA sequences within the hipO, ccoN and cadF genes that are specific to Camp. jejuni and Camp. coli. Using the designed optimized qmPCR assay conditions, the amplification efficiency is in range from 108 to 116%. These qmPCR assays are highly specific for Camp. jejuni and Camp. coli, as seen through testing of 40 Campylobacter strains and 17 non-Campylobacter strains. In chicken juice and tap water models spiked with known quantities of Camp. jejuni, qmPCR detected 10(2) -10(3) CFU ml(-1) within 4 h.

Conclusions: The qmPCR assays developed in this study provide reliable and simultaneous detection and quantification of Camp. jejuni and Camp. coli, with good amplification reaction parameters.

Significance and Impact of the Study: Following further validation, the qmPCR assay reported here has the potential to be applied to various sample types as an alternative and rapid methodology.

Titel:	Detection and quantification of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli using real-time multiplex PCR.
Autor/in / Beteiligte Person:	Toplak, N ; Kovač, M ; Piskernik, S ; Možina, SS ; Jeršek, B
Zeitschrift:	Journal of applied microbiology, Jg. 112 (2012-04-01), Heft 4, S. 752-64
Veröffentlichung:	2022- : Oxford : Oxford University Press ; <i>Original Publication</i>: Oxford : Published for the Society for Applied Bacteriology by Blackwell Science, c1997-, 2012
Medientyp:	academicJournal
ISSN:	1365-2672 (electronic)
DOI:	10.1111/j.1365-2672.2012.05235.x
Schlagwort:	Animals Campylobacter Infections genetics Campylobacter coli genetics Campylobacter jejuni genetics Chickens DNA, Bacterial genetics Meat microbiology Campylobacter coli isolation & purification Campylobacter jejuni isolation & purification Multiplex Polymerase Chain Reaction methods
Sonstiges:	Nachgewiesen in: MEDLINE Sprachen: English Publication Type: Journal Article Language: English [J Appl Microbiol] 2012 Apr; Vol. 112 (4), pp. 752-64. <i>Date of Electronic Publication: </i>2012 Jan 31. MeSH Terms: Campylobacter coli / isolation & purification ; Campylobacter jejuni / isolation & purification ; Multiplex Polymerase Chain Reaction / *methods ; Animals ; Campylobacter Infections / genetics ; Campylobacter coli / genetics ; Campylobacter jejuni / genetics ; Chickens ; DNA, Bacterial / genetics ; Meat / microbiology Substance Nomenclature: 0 (DNA, Bacterial) Entry Date(s): Date Created: 20120120 Date Completed: 20120917 Latest Revision: 20181201 Update Code: 20231215

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