O023 Étude des émulsions lipidiques des mélanges ternaires de nutrition parentérale par résonance magnétique nucléaire

Introduction: et but de l’étude Les mélanges ternaires pour nutrition parentérale sont composés de glucose, acides aminés et lipides supplémentés par des électrolytes, vitamines et oligoéléments. De nombreuses interactions physico-chimiques s’établissent entre les constituants du mélange, affectant la stabilité de l’émulsion lipidique. Les méthodes d’étude classiques de la stabilité ne permettent pas de comprendre les mécanismes des interactions à l’échelle moléculaire. La Résonance Magnétique Nucléaire (RMN) est une technique utilisée pour l’étude des interactions membranes biologiques-électrolytes. Elle permet d’accéder à la composition et à l’organisation des lipides présents dans les échantillons. L’objectif est d’étudier la structure de l’Ivelip® 20 %, une émulsion lipidique commerciale. Matériel et méthodes: L’Ivelip® a été traitée par ultracentrifugation afin de séparer les différents types de particules. 3 phases ont été isolées : le gâteau lipidique, la phase intermédiaire et la mésophase. Un aliquot de la mésophase subira une 2e ultracentrifugation avec un gradient de densité KBr. Des dosages de phospholipides (PL) et triglycérides (TG) totaux sont réalisés sur toutes les fractions avant d’être analysés par RMN (spectromètre Varian® Unity Inova de champ magnétique 11,7 T). Les spectres de RMN Proton (1H), du Phosphore-31 en 1 dimension et en 2 dimensions 1H-1H (COSY) sont acquis en statique puis en rotation afin d’augmenter la sensibilité pour les échantillons organisés. Les données sont enregistrées et traitées par les logiciels Vnmr® et Mestrec®. Résultats: Les concentrations en PL de l’ivelip®, la phase intermédiaire et la mésophase sont respectivement égales à 30, 8 et 3 mM. Un anneau opalescent et 24 fractions sont issus de la 2e ultracentrifugation avec des concentrations en PL de 12mM pour l’anneau et qui de décroissent de 1,2 mM pour atteindre 0,02mM à partir de la fraction 20. Les concentrations en TG de l’ivelip®, la phase intermédiaire, la mésophase et l’anneau sont respectivement de 239, 11, 0,03 et 3 mM. A partir de la fraction 5, il n’y a plus de TG. Les spectres RMN-1H et COSY ont permis d’attribuer les signaux RMN aux protons des lipides présents. Leur quantification a permis de révéler 2 types de populations lipidiques : l’ivelip®, la phase intermédiaire, le gâteau lipidique et l’anneau d’un côté et la mésophase et les fractions de l’autre. Le premier groupe semble être majoritairement composé de molécules non organisées (TG) et le second composé de molécules organisées (PL en liposomes). Conclusions: Cette étape a permis de connaître la composition chimique de nos échantillons. Cette organisation des lipides peut être modifiée lors de l’ajout de calcium. Nous allons ajouter des concentrations de calcium (0-20mM) à l’Ivelip pur et ses fractions. Cette nouvelle approche va permettre d’étudier à l’échelle moléculaire la déstabilisation des émulsions lipidiques par le calcium. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: et but de l’étude Les mélanges ternaires pour nutrition parentérale sont composés de glucose, acides aminés et lipides supplémentés par des électrolytes, vitamines et oligoéléments. De nombreuses interactions physico-chimiques s’établissent entre les constituants du mélange, affectant la stabilité de l’émulsion lipidique. Les méthodes d’étude classiques de la stabilité ne permettent pas de comprendre les mécanismes des interactions à l’échelle moléculaire. La Résonance Magnétique Nucléaire (RMN) est une technique utilisée pour l’étude des interactions membranes biologiques-électrolytes. Elle permet d’accéder à la composition et à l’organisation des lipides présents dans les échantillons. L’objectif est d’étudier la structure de l’Ivelip® 20 %, une émulsion lipidique commerciale. Matériel et méthodes: L’Ivelip® a été traitée par ultracentrifugation afin de séparer les différents types de particules. 3 phases ont été isolées : le gâteau lipidique, la phase intermédiaire et la mésophase. Un aliquot de la mésophase subira une 2e ultracentrifugation avec un gradient de densité KBr. Des dosages de phospholipides (PL) et triglycérides (TG) totaux sont réalisés sur toutes les fractions avant d’être analysés par RMN (spectromètre Varian® Unity Inova de champ magnétique 11,7 T). Les spectres de RMN Proton (1H), du Phosphore-31 en 1 dimension et en 2 dimensions 1H-1H (COSY) sont acquis en statique puis en rotation afin d’augmenter la sensibilité pour les échantillons organisés. Les données sont ... [ABSTRACT FROM AUTHOR]